三代试管婴儿目前主要会通过液密度梯度离心法、上游法出健康活跃的子。液密度梯度离心法就是利用多层Percoll,对子进行优化,在离心30分钟后就活动力强的子穿过整个Percoll。而上游法就是将液混匀后加入离心管中,然后加入培养液,孵育1小时后,吸取上层培养液并稀释,然后再离心5分钟,去除清液即可获得质量较高的子。除此之外,还有简单洗涤法,就是直接离心,收集沉淀的子团。
对于子浓度和活动率大致正常的液,可用直接上游法,但在子症严重少、弱或畸形的情况下,比较好用密度梯度离心法,因为可以回收更多的活动子。
1、直接上游法
直接上游法利用子自身的运动能力将活动子从液中分离出来,可以获得活动好的子,更适合活动子百分比高的液标本。
2、密度梯度离心法。
密度梯度离心常用的方法是由40%的上层和80%的下层组成的两层密度梯度离心液。子通过活子的运动能力和各种细胞的密度差来分离,使子在三代试管婴儿底部形成软沉淀,可获得优质子,无白细胞、不成熟生殖细胞等污染。与简单的上游方法相比,操作更容易标准化,子回收率更高。常用于制备IVF/ICSI液标本。
这两种方法是生殖医学领域的主流液处理方法,能有效去除液中的杂质和细菌,出优质子。哪种子取决于液样品的质量。
三代试管婴儿洗涤之后的子与子结合形成受,再用PGD/PGS查技术,对受培育成的囊胚进行检测,在双重的保护下,确保移植入子宫的是健康胚胎。